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KURAMOCHI細胞

更新時間:2024-11-23

簡要描述:

KURAMOCHI細胞公司正在出售的產(chǎn)品:細胞NF KAPPA B P65蛋白表達比色法定量檢測試劑盒
細胞NF KAPPA B P65蛋白表達熒光定量檢測試劑盒
NF KAPPA B P65蛋白表達西方雜交分析試劑盒
NF KAPPA B P65蛋白免疫共沉淀分析試劑盒
NF KAPPA B P65蛋白表達ELISA定量檢測試劑盒

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公司產(chǎn)品僅供科研研究使用、不得用于臨床診斷!

一、商品介紹:

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

貨號

KURAMOCHI細胞

1×106

P-X9202

 

1、細胞傳代:

1)細胞生長至覆蓋培養(yǎng)瓶的 80%面積時,棄 25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)液,用 PBS 清洗細胞一次;

2)添加 0.25%消化液約 1ml 至培養(yǎng)瓶中,倒置顯微鏡下觀察,待細胞回縮變圓后加入 5ml 培養(yǎng)

液終止消化,再輕輕吹打細胞使之脫落,然后將懸液轉移至 15ml 離心管中,1000rpm 離心 5min;

3)棄上清,沉淀細胞用 1-2ml 培養(yǎng)基重懸,然后按 1:2 比例進行分瓶傳代,最后放入 37℃,5%CO2細胞

培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

2、細胞凍存:

1)細胞生長至覆蓋培養(yǎng)瓶的 80%面積時,棄 25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)液,用 PBS 清洗細胞一次;

2)添加 0.25%消化液約 1ml 至培養(yǎng)瓶中,倒置顯微鏡下觀察,待細胞回縮變圓后加入培養(yǎng)液終

止消化,輕輕吹打細胞使之脫落,然后將懸液轉移至 15ml 離心管中,1000rpm 離心 5min;

3)用適量的凍存液(FBS:DMSO=9 :1)重懸細胞,并放置于凍存管中;

4)先將細胞凍存管放置于-20℃ 1.5h,然后將其移入-80℃過夜,24h 后轉入液氮中進行長期保存。使用程序

降溫盒可直接放入-80℃。

二、細胞培養(yǎng)操作

1) 復蘇細胞:以下細胞培養(yǎng)凍存處理僅供參考,具體操作步驟以隨貨產(chǎn)品說明書為主。將含有1 mL細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,加4 mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000 rpm條件下離心3 min,棄去上清液,加1-2 mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入含適量培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或將細胞懸液加入10 cm皿中,加入約8 mL培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。

2) 細胞傳代:如果細胞密度達 80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。

a、棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。

b、加1 mL消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,使消化液浸潤所有細胞,將培養(yǎng)瓶置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2 min(視細胞情況而定),然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加2-3ml培養(yǎng)基終止消化。輕輕打勻后裝入無菌離心管中,1000 rpm離心5 min,棄去上清液,補加1-2 mL培養(yǎng)液后吹勻。

c、將細胞懸液按1:2比例分到新的含8 mL培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,置于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。 3) 細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為例;a、收集細胞及細胞培養(yǎng)液,裝入無菌離心管中,1000 rpm條件下離心4 min,棄去上清液,用PBS清洗一遍,棄盡PBS,進行細胞計數(shù)。

b、根據(jù)細胞數(shù)量加入無血清細胞凍存液,使細胞密度5×106~1×107/mL,輕輕混勻,每支凍存管凍存1mL細胞懸液,注意凍存管做好標識。將凍存管放入-80℃冰箱,24 h后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

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公司正在出售的產(chǎn)品:

體外非細胞系統(tǒng)血紅素氧合酶(HEME OXYGENASE)活性比色法定量檢測試劑盒

48孔板細胞基因組DNA分離試劑盒

酵母/真菌D-糖含量氧化法定量檢測試劑盒

細胞FSH-BETA蛋白表達流式細胞儀檢測試劑盒

通用型豬傳染性胃腸炎/豬呼吸冠狀病毒(TGEV/PRCV

體液總汁酸酶偶聯(lián)反應比色法定量檢測試劑盒

血液磷酸甲羥戊酸激酶(phosphomevalonate kinase)活性

石蠟切片脂質過氧化物4-羥基壬烯醛(4HNE)熒光染色試劑盒

冰凍切片溶酶體脂酶(酸性脂酶)活性染色試劑盒

腸胃活檢螺旋桿菌(H. PYLORI)亞甲基藍(METHYLENE BLUE)染色試劑盒

PAR-1蛋白表達西方雜交分析試劑盒

飲料D-糖酸鹽比色法定量檢測試劑盒

細胞氯乙酰基轉移酶(CAT)報告基因活性同位素定量檢測試劑盒

組織AMPK激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C

動物組織活性內質網(wǎng)分離試劑盒

整合素連接激酶相關絲/蘇磷酸酶抗體

干細胞生長因子SCGF抗體

k鏈恒定區(qū)抗體

LCHN蛋白抗體

細胞色素P450 2J2抗體

γ1氨基丁酸受體GABAA Rβ1抗體

離子通道蛋白Kv3.4抗體

KURAMOCHI細胞Bcl-xL蛋白重組兔單克隆抗體

胸腺基質淋巴細胞生成素-1抗體

三、培養(yǎng)注意事項 

1. 收到細胞后首先觀察細胞瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象,若有上述現(xiàn)象 發(fā)生請及時和我們聯(lián)系。

2. 仔細閱讀細胞說明書,了解細胞相關信息,如細胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需 細胞因子等,確保細胞培養(yǎng)條件一致,若由于培養(yǎng)條件不一致而導致細胞出現(xiàn)問題,責任由 客戶自行承擔。

3. 用 75%酒精擦拭細胞瓶表面,顯微鏡下觀察細胞狀態(tài)。因運輸問題,部分細胞由于溫度 變化及劇烈碰亡破碎形成碎片,是正常現(xiàn)象。觀察好細胞狀態(tài)后,75%酒精消毒瓶壁將 T25 瓶置于 37℃培養(yǎng)箱放置 2-4h。

4. 貼壁細胞可以消化,懸浮細胞直接混勻收集細胞,900 rpm-1000 rpm 離心 3 min,棄上 清。加 5 mL PBS 重懸細胞,再 900 rpm-1000 rpm 離心 3 min,用新鮮的培養(yǎng)基重懸 細胞,并接種到新的培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿中,置于培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)。

5. 請客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細胞培養(yǎng)。

6. 建議客戶收到細胞后前 3 天各拍幾張細胞照片,記錄細胞狀態(tài),便于和我司技術部溝通 交流。由于運輸?shù)脑颍瑐€別敏感細胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況,請及時和我們聯(lián)系,告知細胞 的具體情況,以便我們的技術人員跟蹤回訪直至問題解決。

7. 該細胞僅供科研使用。

8. 備注:運輸用的培養(yǎng)基 (灌液培養(yǎng)基) 不能再用來培養(yǎng)細胞,請換用按照說明書細胞培 養(yǎng)條件新配制的培養(yǎng)基來培養(yǎng)細胞。     收到細胞后第一次傳代建議 1:2 傳代 。

9. 注意:  1:2 傳代就是 1 個 T25 瓶傳 2 個 T25 瓶或者 2 個 6cm 皿。不是 1 個 T25 瓶傳 2 個10cm 皿。


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